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26 在试管婴儿病例中比较aCGH和传统形态评估方法对单个囊胚新鲜移植的成功率
发布日期:2012-11-1 15:41:26 来源:北京博尔诚医学检验所

文章题目:在试管管婴儿病例中比较aCGH和传统形态评估方法对单个囊胚新鲜移植的成功率

文章出处Molecular Cytogenetics, 2012,5:24

链接http://www.molecularcytogenetics.org/content/5/1/24/abstract

SCI影响因子:2.41

研究背景:多胚胎妊娠是辅助生殖中最复杂的,因此选择单胚胎移植被认为是在体外受精后避免多胚胎妊娠有效的手段。尽管有这种认识,但是在体外受精后一些医院仍然是选择2个或多个胚胎进行移植。主要是由于目前选择胚胎或者囊胚主要是基于形态学的方法,这种选择方式不能排除所选择的胚胎具有潜在的染色体问题,因此选择单一一个看起来正常的胚胎具有很大的风险,这就是为什么医院仍然比较喜欢移植两个以上的胚胎。非整倍体Aneuploidy是体外受精发育来的胚胎最容易遇到的染色体体问题,这也是导致体外受精最终生育成功率低的原因。有人已经开始用FISH方法来检测胚胎的染色体异常,但是FISH不能筛查所有的染色体,因此作用仍然很局限。目前SNP芯片以及aCGH都已经被成功用于辅助生殖过程中胚胎整个基因组的筛选,主要是在胚胎第3天筛选,然后第5天把新鲜胚胎进行移植。但由于在第3天和第5天的胚胎存在嵌合体,筛选的单细胞可能并不代表整个胚胎的质量,因此现在有趋势来在囊胚阶段进行筛选。在囊胚阶段,嵌合体的现象会减小,那些染色体有问题的细胞往往不能发育而被淘汰。本研究就是在年龄<35岁,其他诊断正常,第一次进行试管婴儿的患者中,利用aCGH芯片快速筛选染色体正常的囊胚进行新鲜移植的结果初步小结。

实验方法:单盲测试,取滋养层细胞分别用传统的显微镜观察和aCGH芯片分析。入选的病人条件:年龄<35岁,排卵周期有正常规律、不孕是由于输卵管问题或者男方问题,之前没有进行过试管婴儿过程。病人随机分为两组,Group A 55人,用传统形态学评估+aCGH分析;Group B, 48人,只用传统形态学评估。

取滋养层细胞进行比较。芯片用的BlueGnome 24Sure BAC文库芯片,用Agilent的扫描仪扫描(10um的分辨率扫描)。

囊胚质量用传统的方法进行分级,一共分为6级。新鲜的经过筛选后的囊胚在第6天进行移植。aCGH+形态评估后的囊胚只取一个好的进行移植;单独形态评估后的囊胚也只取一个好的进行移植;

结果和讨论:在A组中,一共有425个囊胚细胞被进行评估(平均7.7囊胚/人),发现有191/425 44.9%)的囊胚是非整倍体;在这191个非整倍体中,68/19135.6%)是单体;而20.9%是三体;另外的43%囊胚则是染色体发生多种畸变;在A组病人中,每个人至少能找到一个正常的胚胎进行移植;在B组中,一共评估了389个囊胚(平均8.1个囊胚/人)。

在第6天新鲜移植单个囊胚后,发现在A组经过aCGH+形态评估的病人怀孕率比只形态评估的显著性高(69.1 vs. 41.7%,p=0.009)。

以前用SNP芯片进行试管婴儿胚胎评估的应用,由于SNP芯片时间较长,一般只能把囊胚冻存,等SNP芯片分析完后,在融化囊胚进行移植;而由于aCGH分析时间短,因此可以不用冻融囊胚,可以取新鲜的囊胚进行移植。


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